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戴安液相色谱柱的这些小细节,你注意到了吗?
时间:2022-01-13      阅读:255
  戴安液相色谱柱的维护
  1、建议使用保护柱,防止颗粒进入柱内造成堵塞;
  2、建议选择合适pH范围的色谱柱,避免填料溶剂老化;
  3、缓冲盐的正确使用:
  缓冲盐使用不当会沉淀,堵塞筛板和填料,使填料变硬,增加柱压,阻碍基质上键合相的碳链自由伸展,降低色谱柱的保留能力,降低柱效率并缩短其使用寿命。缓冲盐分离后很难去除。因此,正确使用缓冲盐对于延长色谱柱的使用寿命非常重要。
  戴安液相色谱柱使用前过渡,使用后冲洗
  1、等度条件:用过渡流动相制备前后柱体积不少于20-30柱,或制备后用过渡流动相以1.0ml/min(根据色谱柱规格调整)洗柱体积过夜;
  2、梯度条件:制备前,用与初始流动相相同的流动相组成,以工作流速洗涤色谱柱不少于20-30柱体积;配制后用过渡流动相洗色谱柱不少于20-30柱体积,梯度尽量平缓,避免缓冲盐沉淀;
  3、过渡型流动相:有机相和水相的比例与分析流动相中两相的比例一致,或者水相的比例高于分析流动相,完全没有缓冲盐;
  强保留物质在戴安液相色谱柱中的积累是一个缓慢的过程,导致峰展宽和拖尾,柱效下降,保留时间改变,柱压升高;很难判断复杂样品中是否存在强滞留物质,因此必须杜绝所有这些方法。每天分析完毕后,用纯甲醇或乙腈反洗色谱柱20柱体积以上。
  戴安液相色谱柱清洗方法:
  1、没有使用缓冲盐。每天使用后,用纯甲醇或纯乙腈的柱体积在20以上;
  2、上述方法除去缓冲盐后,用纯甲醇或纯乙腈反洗柱子20柱体积以上;
  3、处理方法:水→乙腈→异丙醇(或氯仿)→乙腈→水,每步洗涤不少于30柱体积。
  注意:不要轻易打开柱头,因为柱头一旦打开,就很难恢复到新柱的水平。因柱头开启造成的检测后果由客户负责。
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